EdU细胞增殖检测试剂盒

2021-10-13

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一、细胞，增殖直接测定DNA合成常用法

直接测定DNA合成是细胞增殖检测的最准确方法之一，常用检测法有BrdU检测和新型EdU检测。

	BrdU	EdU
原理	BrdU为胸腺嘧啶衍生物，可与胸苷竞争掺入DNA，再用抗BrdU单抗，经ICC染色，显示增殖细胞。	EdU是一种胸腺嘧啶脱氧核苷类似物，可代替胸苷掺入正在复制的DNA分子中，通过EdU与荧光标记特异性反应快速检测DNA复制活性。
检测分子	大	很小，BrdU抗体的1/500
检测方式	免疫反应	化学反应
影响其他标记	是	否
DNA变性	需要	不需要
实验时间	过夜	2.5h
检测敏感度	一般	灵敏
植物细胞检测	需消化细胞壁，细胞壁消化酶常含杂质，甚至破坏细胞形态表征，降低准确性	无需消化细胞壁即可完成检测，检测便捷准确
优缺点	破坏了DNA双链结构，影响了其他染料的结合染色，出现染色弥散，准确性降低	染料易扩散特异性好，不破坏DNA和核的结构，避免样品损伤，无需抗原抗体反应，可准确反映细胞和组织水平DNA复制活性

BrdU需DNA变性后才能与抗体结合，导致BrdU、Hoechst染色弥散，边缘模糊不清；EdU边缘清晰完整，检测灵敏准确

二、EdU检测原理

EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)，中文名为5-乙炔基-2' -脱氧尿苷，是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷，thymidine)类似物，EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针（如YF488/555/594/647）通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Click reaction) 。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记，运用荧光检测设备（荧光显微镜、流式细胞仪等）检测到增殖的细胞。

三、EdU检测应用

细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪、线粒体活性、动物活体注射等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

EdU应用	详情
动物活体注射实验	EdU适用于各种动物活体注射，稳定无副作用，检测时间可以从几小时至数十天，也适用于石蜡或冰冻组织切片检测，完全满足动物细胞增殖的检测，是全面分析组织或器官细胞增殖的理想工具。
植物成像实验	EdU分子小可透过细胞壁，无需DNA变性和抗原抗体反应，可准确检测植物生长发育分化等性状的细胞增殖情况，其适用于各种单/双子叶植物的细胞增殖检测。
细胞标记示踪	标记示踪可直观了解细胞在体内的分布，还可追踪其体内的分化转化及调控机制。EdU能竞争性地渗入正在复制的DNA分子，从而达到标记分裂细胞的目的，简单快速准确示踪细胞，示踪标记时间长达6周，远胜于BrdU。
DNA损伤修复检测	代谢活动和环境因素（如紫外线）等能造成人体细胞DNA分子结构的破坏，进而改变细胞阅读信息和基因编码的方式。DNA损伤修复须经常运行，快速改正DNA结构的任何错误。EdU可快速有效标记，细胞核的荧光强度跟DNA损伤修复活性成正相关。
线粒体活性检测	线粒体是动物细胞的一种半自主细胞器，具有自身特异的DNA分子。这类环状双链DNA记载了线粒体的遗传信息。采用EdU可以同时标记线粒体DNA，结合APH即可实现针对线粒体DNA复制活性的检测。
病毒增殖活性检测	病毒DNA复制是病毒增殖的一个重要表现，采用EdU方法可快速检测病毒DNA的复制活性，并掌握病毒增殖的位点。

四、EdU检测试剂盒特点

YF染料标记多种颜色可选择；荧光亮度高；光稳定性好，适合做显微镜检测

简单—仅需三步：EdU孵育，细胞固定化，荧光检测

快速—检测只需2.5 h，大大缩短实验周期

准确—标记率高且无需变性，更好地保护细胞形态

兼容—允许与多种抗体、荧光蛋白同时标记，可同时检测细胞其他性状特征

灵敏—YF染料易扩散，单个增殖细胞也可准确检测

五、实验图

5.1 显微镜观察

YF^®594 Click-iT EdU hoechst核复染 Overlay

EdU检测试剂盒可以很好的将处于增殖状态的细胞标记出来

5.2 流式细胞仪

加羟基脲抑制增殖
正常细胞增殖

Hela细胞，10 μM EdU孵育2h。

YF^®594 Click-iT EdU可清楚的分离已结合EdU的增殖细胞与未结合EdU的非增殖细胞

六、产品目录

	货号	产品名称	规格	目录价（RMB）
	E6032-2mg	EdU	2mg	2500
	E6032-10mg		10mg	3800
	E6032-50mg		50mg	5100
EdU（细胞成像）	C6015-100T	YF^®488 Click-iT EdU Imaging Kits（绿色荧光）	100T	1100
	C6015-500T		500T	2200
	C6015-1000T		1000T	3600
	C6016-100T	YF^®555 Click-iT EdU Imaging Kits（橙红色荧光）	100T	1100
	C6016-500T		500T	2200
	C6016-1000T		1000T	3600
	C6017-100T	YF^®594 Click-iT EdU Imaging Kits（红色荧光）	100T	1100
	C6017-500T		500T	2200
	C6017-1000T		1000T	3600
	C6018-100T	YF^®647A Click-iT EdU Imaging Kits（远红荧光）	100T	1100
	C6018-500T		500T	2200
	C6018-1000T		1000T	3600
EdU（细胞流式）	C6019-20T	YF^®488 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（绿色荧光）	20T	1800
	C6019-50T	YF^®488 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（绿色荧光）	50T	4000
	C6020-20T	YF^®555 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（橙红色荧光）	20T	1800
	C6020-50T	YF^®555 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（橙红色荧光）	50T	4000
	C6021-20T	YF^®594 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（红色荧光）	20T	1800
	C6021-50T	YF^®594 Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（红色荧光）	50T	4000
	C6022-20T	YF^®647A Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（远红荧光）	20T	1800
	C6022-50T	YF^®647A Click-iT EdU Flow Cytometry Assay Kits（远红荧光）	50T	4000